细胞计数及计算程序分享
如何正确使用血球计数板
视频来源:B站
视频制作:京师出版
基本原理
血球计数板最早是由19世纪法国解剖学家(anatomist)Louis-Charles Malassez 先发明的,当时他用来计量血细胞。
血球计数板的基本原理是,在已知大小的方格网中,先确定每个小方格中的微生物,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
简单来说,就是固定体积来数其中的细胞个数,再计算其浓度。
一般的血细胞计数板是一个大H形状,分为上下两部分。无论是上面还是下面其微观结构都如图C所示。其中按照内部大格子的多少分类,又可分为汤麦式 (图D,大方格内分为25中方格,每中方格又分为16小格,即25 X 16)和 希利格式(大方格内分为16中方格,每一中方格又分为25小格,即 16 X 25),总之一共就是400个小格子。
而我们的计数区域边长为1mm ,面积为1mm^2,盖上盖玻片后,计数室的高度为0.1mm,所以计数室体积是固定的0.1mm^3(0.1*10^-3 ml)而每个小方格的体积为1/4000 mm^3.
现在我们只需要选择正确的计算公式,以及数清楚格子内的细胞数量即可计算了。(注意:如果细胞在格子线上,一般遵循计上不记下,计左不计右的原则)
汤麦式: 大方格内分为25中方格,每中方格又分为16小格,即25 X 16
酵母细胞个数/1mL =80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
希利格式:大方格内分为16中方格,每一中方格又分为25小格,即 16 X 25
酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
注意
在编写本部分内容的时候,参考多种资料。采取不同计数方法的
话,统计公式会有变化,请同学们注意甄别。
例:
统计大格:https://www.abcam.cn/protocols/counting-cells-using-a-haemocytometer
https://zhuanlan.zhihu.com/p/548726626
计算小程序
血细胞计数计算器
细胞计数个数 | |||||
稀释倍数 | |||||
细胞浓度 个/mL(汤麦式) | |||||
细胞浓度 个/mL (希利格式) | |||||
铺板密度(个/100μL)(96孔板) | |||||
稀释倍数(汤麦式) | |||||
稀释倍数 (希利格式) |